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In-Fusion技术是一项新型的无缝克隆技术。该技质粒末端术关键是要在目的基因两端构建与线性化相同的DNA序列(即同源序列,通常为15~20bp),然后用In-Fusion 酶处理即可实现无缝连接。它的操作步骤大致为:①质粒线性化;②PCR扩增出两目的基因端含线性化质粒同源序列的目的基因;③用下形成与线性化质粒同源区域在In-Fusion 酶作重组质...

CRISPR/CAS9基因组编辑技术源于细菌抵御噬菌体的机理研究。细菌被特定噬菌体感染后,细菌Cas2会随机切断入侵的噬菌体DNA双链,并将切下的一个DNA片段(原型间隔序列)插入CRISPR位点(由间隔序列和重复序列交替排列组成的基因序列)的重复序列中,构成新的间隔序列,形成“免疫记忆”。当同种噬菌体再次入侵时,由CRISPR位点的新的间隔序列转录产...

(9分)修复DNA双断裂的细胞通路在细胞生长、发育和癌变中具有关键作用,近年科学家在哺乳动物真核细胞内发现参与此通路的一种独特的 DNA聚合酶(Polθ)。当DNA双链发生断裂时、某些酶会在断裂处将5'端链切割(原双链DNA两端的5'端因连有特殊物质“●”,而避免被切割),形成局部单链DNA(ssDNA悬臂)。其上某些区域的碱基可互补配...

科研人员以浮萍为实验材料,成功建立了其稳定的遗传转化体系,并用遗传转化(转基因)技术实现了浮萍药用蛋白生物反应器的建立。建立过程使用的CRISPR/Cas9基因编辑技术可以按照人们的意愿精准剪切、改编任意靶基因的遗传信息,其原理是由一条单链向导RNA(SgRNA)引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点进行切割,便于目的基因与载体的连接。(1)sgRNA能...

本题只连锁未交换。黄瓜为雌雄同株异花植物,同一植株上既有雌花也有雄花,雌花率影响黄瓜产量。研究人员利用黄瓜纯合雌雄同株品系甲培育出全雌株(只有雌花)品系乙。为确定全雌性状形成的分子机制,研究人员进行了如下实验。(1)品系甲与品系乙杂交,获得的F1表现为全雌,说明全雌为___________性状。将F1与品系甲杂交,获得的子代表现型及比例为_______...