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In-Fusion技术是一项新型的无缝克隆技术。该技质粒末端术关键是要在目的基因两端构建与线性化相同的DNA序列(即同源序列,通常为15~20bp),然后用In-Fusion 酶处理即可实现无缝连接。它的操作步骤大致为:①质粒线性化;②PCR扩增出两目的基因端含线性化质粒同源序列的目的基因;③用下形成与线性化质粒同源区域在In-Fusion 酶作重组质...

研究发现,通过位点特异性重组系统删除目的基因和标记基因策略成为目前解决转基因植物生物安全性问题的条理想途径。Cre/LoxP重组酶系统由重组酶Cre和LoxP位点组成,LoxP位点包含两个识别序列和8bp的切制序列,DNA的切割和连接发生在8bp的切制序列,如图1所示,Loxp序列对启动子的功能无影响。当DNA分子中含两个同向LoxP位点时,重组酶将删...